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單層凍干管的開啟和菌種復蘇方法

發布日期:2017-01-07

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上海生物網20161216日報道

  單層凍干管的開啟方法

1)滴水破開法

   首先用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,然后將凍干粉甩至底部圓球位置,將凍干管的尖端(注意不是圓球端)放在火焰上加熱。然后迅速滴幾滴無菌水至加熱處,此時凍干管的尖端會自動破開。最后用鑷子輕輕敲下凍干管尖端,并將凍干管開口處在火焰上加熱滅菌一下,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。然后逐漸敲開凍干管,直至適當位置。(敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準)

 

2)首先用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,將凍干管的尖端(注意不是圓球端)放在火焰上加熱。然后將凍干粉甩至底部圓球位置。直接用大鑷子敲打尖端,敲開后將破口處在火焰上加熱滅菌一下,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。 然后逐漸敲開凍干管,直至適當位置。(敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準)

 

菌種復蘇方法

1)菌種活化前,如要長期保藏,可將凍干管放在-20度條件下保存。

2)此凍干菌是經凍干燥并抽真空保存的,開啟后必須一次使用完,不能剩菌粉下次使用。

3)凍干管中大部分是用牛奶做?;ぜ?,菌體為少數,復蘇時要全部菌懸液接種在新鮮培養基上,否則可能造成復蘇不成功。

4)凍干粉是在凍干燥保存后處于休眠狀態,有時延滯期較長,如在說明書建議的培養時間還未長出,請繼續在相應的環境下多培養24小時或更長時間,直至菌種培養出。

5)正常情況下,菌種是需要培養2代后才會具備穩定的活性,所以建議做2次繼代培養后才能用于您后續的實驗。

6)打開凍干管應在專業的微生物專業人員才可操作,注意生物危害程度為三級的菌種應在生物安全柜中操作。其中標準菌種可以在超凈臺中操作,并且做好個人防護??蓯幣⒁庾齪酶鋈嗣娌糠闌?,防止碎片飛入眼中。

7)以上開管操作都應該在安全柜或超凈臺中操作,并且昨晚后所有器皿都要經滅菌后再銷毀。

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